脂肪间充质干细胞/壳聚糖支架复合物：将脂肪间充质干细胞制成细胞浓度为5×1010L-1的细胞悬液，均匀置于壳聚糖支架中，每个支架滴加200μL，于6孔培养板中温箱孵育4h，待细胞附着贴壁后，每孔加5mL完全培养基(DMED-HG)于37℃、体积分数为5%CO2培养箱中培养2d。
胰岛素样生长因子1：是一种丝裂素生长因子，与前胰岛素在氨基酸序列上有同源性，是一种既有促进细胞增殖活性，又具有胰岛素样作用的生长激素依赖性多肽，它通过生长激素-胰岛素样生长因子轴来实现其强有力的刺激合成代谢的作用。
背景：脂肪间充质干细胞是目前公认的较为优秀的组织工程软骨种子细胞，基因转染技术可以有效诱导其成软骨分化，应用生物反应器模拟体内力学环境，是目前广大学者探索体外构建组织工程软骨的新思路。
目的：探讨周期性动态压应力联合胰岛素样生长因子1基因转染对种植于壳聚糖/明胶支架中的兔脂肪间充质干细胞增殖能力和弹性模量的影响。
方法：在脂质体介导下应用基因转染兔脂肪间充质干细胞，G418筛选，获得稳定转染的细胞株；将负载或不负载胰岛素样生长因子1基因的脂肪间充质干细胞以5×1010L-1的密度接种于壳聚糖/明胶支架中培养2d，然后分别于动态压力(2%形变，1Hz，4h/d)环境中或静态培养条件下培养7d；扫描电镜、Masson三色染色及阿尔新蓝染色观察细胞/支架复合物的形态学变化，MTT法绘制细胞增殖曲线，CM-Dil荧光染料标记细胞计数评估细胞增殖效率，DMMB定量测定软骨特异性细胞外基质糖胺聚糖含量，RealtimePCR法检测软骨特异性基因Ⅱ型胶原的相对表达，应用BioDynamicTMmechanicaltester测量各组细胞/支架复合物不同形变时的轴线压应力，计算对应的弹性模量。
结果与结论：动态压力联合胰岛素样生长因子1转染可显著提高脂肪间充质干细胞的增殖能力，细胞分布更为均匀，软骨特异性细胞外基质糖胺聚糖及胶原分泌增多，上调Ⅱ型胶原基因的表达，机械性能显著改善。单纯胰岛素样生长因子1组的细胞增殖能力和弹性模量均优于单独动态压力组，但动态压力条件下细胞在支架中分布更为均匀。结果表明，动态压力与胰岛素样生长因子1基因转染均可显著提升兔脂肪间充质干细胞的增殖能力和机械性能，二者呈协同作用。
(张传辉)
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
关键词:干细胞,脂肪间充质干细胞,压力,软骨细胞,胰岛素样生长因子1,弹性模量,组织工程
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